Table 1.

cAMP and cGMP Kds for the wild-type and CNB domain mutants

Structural motif Mutant cAMP Kd cGMP Kd Kd ratio n 
  nM nM   
 Wild type 148 ± 22 1,731 ± 264 11.7 
β4–β5 hairpin V282L 1,008 ± 53 8,951 ± 743 8.9 
 T284N 342 ± 41 6,556 ± 633 19.2 
 T284Q 731 ± 90 6,952 ± 1312 9.5 
 T284S 464 ± 58 2,984 ± 379 6.4 
 V288A 393 ± 50 2,544 ± 355 6.5 
 V288L 201 ± 19 996 ± 163 5.2 
 V288I 138 ± 39 797 ± 118 5.8 
 V288S 1,205 ± 160 2,105 ± 128 1.7 
αP helix M299C 501 ± 99 2,942 ± 357 5.9 
 M299Q 734 ± 134 11,649 ± 2,621 15.9 
C terminus A352S 174 ± 23 727 ± 160 4.2 
 A352D 256 ± 29 850 ± 121 3.3 
αC helix R348A 24,822 ± 3182a 38,781 ± 2,449a 1.6 
 R348N 19,142 ± 507a 32,106 ± 3,844a 1.7 
 R348Q 25,097 ± 2,216a 46,062 ± 5,609a 1.8 
 R348K 16,446 ± 842a 23,547 ± 982a 1.4 
 R348Y 24,174 ± 2,214a 33,172 ± 4,771a 1.4 
V288S/A352S  691 ± 72 749 ± 75 1.1 
V288S/A352D  547 ± 111 351 ± 95 0.64 
T284S/V288S/A352D  2,190 ± 347 336 ± 126 0.15 
Structural motif Mutant cAMP Kd cGMP Kd Kd ratio n 
  nM nM   
 Wild type 148 ± 22 1,731 ± 264 11.7 
β4–β5 hairpin V282L 1,008 ± 53 8,951 ± 743 8.9 
 T284N 342 ± 41 6,556 ± 633 19.2 
 T284Q 731 ± 90 6,952 ± 1312 9.5 
 T284S 464 ± 58 2,984 ± 379 6.4 
 V288A 393 ± 50 2,544 ± 355 6.5 
 V288L 201 ± 19 996 ± 163 5.2 
 V288I 138 ± 39 797 ± 118 5.8 
 V288S 1,205 ± 160 2,105 ± 128 1.7 
αP helix M299C 501 ± 99 2,942 ± 357 5.9 
 M299Q 734 ± 134 11,649 ± 2,621 15.9 
C terminus A352S 174 ± 23 727 ± 160 4.2 
 A352D 256 ± 29 850 ± 121 3.3 
αC helix R348A 24,822 ± 3182a 38,781 ± 2,449a 1.6 
 R348N 19,142 ± 507a 32,106 ± 3,844a 1.7 
 R348Q 25,097 ± 2,216a 46,062 ± 5,609a 1.8 
 R348K 16,446 ± 842a 23,547 ± 982a 1.4 
 R348Y 24,174 ± 2,214a 33,172 ± 4,771a 1.4 
V288S/A352S  691 ± 72 749 ± 75 1.1 
V288S/A352D  547 ± 111 351 ± 95 0.64 
T284S/V288S/A352D  2,190 ± 347 336 ± 126 0.15 

Kds were determined by competition at a constant ligand concentration and with variable protein concentration; except for those marked with footnote a. Kd ratio is calculated from (cGMP Kd/cAMP Kd); n, number of repetitions.

a

Kds were determined by competition at a constant protein concentration and with variable ligand concentration.

or Create an Account

Close Modal
Close Modal